ror-6000

实验方法．从细胞中克隆基因从细胞中提取总并逆转录成，并用该作为扩增基因的模板。为了获得能够用抗生素筛选的稳定转染细胞系，再通过和位点将-和片段亚克隆入含嘌呤霉素抗性基因的载体质粒中，构建得到-和质粒。产物亚克隆入质粒-中，然后通过限制性内切酶和进行酶切初步鉴定，并送生物公司作进一步测序鉴定。

结果：该方法标准曲线的相关系数为融解曲线分析显示单个峰，质粒标准品高低拷贝数的批内批间变异系数分别为和。

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样本相对表达量的检测将样本标准品空白对照阴性对照及对照按照上述反应体系和反应条件同时进行扩增，根据标准曲线分别检测每个样本的和β肌动蛋白，，以β肌动蛋白为参照校准的相对表达。

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